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杨光心里越想越是气，手上动作却没有停下。
他取乌骨藤干燥药材50千克，粉碎，那种狠劲，看得周围的人已经杨光在弄什么不共戴天的仇人一般。
然后，他分别用百分之70乙醇8倍、6倍量回流提取2次，每次2小时，合并2次提取液，减压浓缩至浸膏，加水溶解。
再依次用石油醚、乙酸乙酯、水孢和正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇并浓缩得浸膏392克。
再之后，他取了正丁醇萃取后的浸膏114克，经硅胶柱层析色谱分离，依次以氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，分段接收共得到26个流分。
其中流分2再经硅胶柱层析色谱分离分别以石油醚-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱，收集体积比为100∶6和100∶18洗脱部分。
流分4再经硅胶柱层析色谱分离，分别以氯仿-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱。
收集体积比为100∶2和100∶15洗脱部分，其中体积比为100∶2的洗脱部分在氯仿中反复重结晶得化合物164g。
体积比为100∶15洗脱部分再经SephdexLH-20凝胶柱色谱分离，收集氯仿-甲醇混合溶剂（1∶2）洗脱部分。
取上述3个洗脱部分，经TLC检识，成分有所交叉，故将三者合并，甲醇超声溶解，备用。
等上述做完了之后。
杨光看了一眼结果，说道：“大家谨慎一些，宁愿做慢一些，也不要因为我们想要赶进度而报废了。”
“好的。”
“好的，杨科长，没有问题。”
虽然近七八年的结果近在眼前，众人还是强迫自己冷静下来。
然后进入半制备液相色谱分离。
取了上述溶液，用0.45μ微孔滤膜滤过，注入半制备液相色谱仪。
“色谱条件为色谱柱∶（250×10i.d.，5μ）。”
“流动相∶甲醇-水98∶2，VV。”
“进样浓度∶5gL。进样量∶600μL，流速∶4Lin。”
“柱温∶25℃。检测波长∶210n。”
研究员们一个个把手中的仪器数据报备道。
“根据色谱峰出峰时间接受流分，分离得到化合物Ⅱ23.6g、化合物Ⅲ30.1g和化合物Ⅳ27.1g，纯度96%。”
杨光看了一眼，说道。
“接下来是样品结构的测试。”
“取上述4种化合物分别进行核磁共振谱（NMR）、质谱（MS）、红外（IR）光谱的测试。”
NMR测试条件∶化合物I、Ⅱ、Ⅳ以CDCl，为溶剂，化合物Ⅲ以C，D，N为溶剂，TMS为内标。
IR测试条件为：KBr压片。
HRMS测试条件：离子源为API-ES，正离子或负离子方式检测，夫溶剂化气为N。
低分辨ESI-MS测试条件。离子源为ESI，正离子和负离子方式检测，去溶剂化气为He。
“争取在今天我们就要有一个结果，不论多晚！”杨光大声地吼道。
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